Wnt信號(hào)抑制因子1抗體

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

The Wnt genes are a group of conserved, Cysteine-rich, secreted glycoproteins that are required for numerous developmental processes including embryogenesis, asymmetric cell division and central nervous system (CNS) patterning. Wnt association

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠抑制素βE(INHβE)ELISA試劑盒 LH 促黃體生成素 96T

MAGEA11： 黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3

AE-1雜交瘤細(xì)胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清 大鼠抑制素βC(INHβC)ELISA試劑盒 FSH 促卵泡生成素 96T

MAS1L： G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體 RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠抑制素βA(INHβA)ELISA試劑盒 PLH 催乳素 96T

Nuclear Matrix Protein p84： 核基質(zhì)p84蛋白抗體 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SK-N-SH細(xì)胞，人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg 人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒 NT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原) 0.5mg

Centromeric histone H3-like protein-2： 組蛋白H3樣抗體 HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 NT-4,NT-5 神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5(抗原) 0.5mg

Centromeric histone H3-like protein-1： 組蛋白H3樣抗體 人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC

Wnt信號(hào)抑制因子1抗體phospho-PI 3 Kinase p110 delta (Tyr524)： 0酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SW-13人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW-13 cells of small cell carcinoma of adrenal cortex L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠活性氧調(diào)制因子1(ROMO1)ELISA試劑盒 TpP(Mouse thrombus precursor protein?煰?

3

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類(lèi)型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無(wú)法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類(lèi)似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過(guò)程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^(guò)程中的變性和還原，靶蛋白具有線(xiàn)性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無(wú)法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線(xiàn)性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。